Позвольте задать тупой вопрос про ТСХ.
Есть методика ТСХ, где подвижной фазой используется следующее:
Develop the chromatogram in an equilibrated chamber containing n-butyl alcohol previously shaken with 1 N hydrochloric acid, until the solvent front has moved about three-fourths of the length of the plate
Методика USP, и больше в ней ничего не сказано, как такую подвижную фазу из "встряхнутого с солянкой н-бутилового спирта" готовить. В реагентах этого бутилового спирта нету в ЮСП и Европе. Предполагается, что каждому лаборанту будет понятно, как подвижную фазу подготовить. А мне вот непонятно 🙄
Например, хочу я этой подвижной фазы приготовить миллилитров 200. И сколько мне нужно взять этого спирта и однонормальной солянки? В каком соотношении их брать? Или солянки нужно всего пару кубиков, на глаз?
Покорно прошу просветить или указать, в каком учебнике почитать, чтобы не задавать таких вопросов.
В той цитате которую Вы привели, указано лишь, что камера должна быть насыщена, состав системы и сколько система должна пройти по пластине.
Видимо из методики сознательно выкинули соотношение компонентов подвижной фазы. Либо вы пропустили это описание...
Можно полный текст методики в студию 🙂 ?
Полный текст методики из монографии Betamethasone Sodium Phosphate Injection
Identification— Dilute the Injection with methanol, if necessary, to obtain a solution containing about 2 mg of betamethasone sodium phosphate per mL. Separately apply 10 µL of this test solution and 10 µL of a solution of USP Betamethasone Sodium Phosphate RS in methanol containing 2 mg per mL to a thin-layer chromatographic plate (see Chromatography 621) coated with chromatographic silica gel mixture. Develop the chromatogram in an equilibrated chamber containing n-butyl alcohol previously shaken with 1 N hydrochloric acid, until the solvent front has moved about three-fourths of the length of the plate. Remove the plate from the developing chamber, air-dry, then spray with a mixture of sulfuric acid, methanol, and nitric acid (10:10:1). Heat the plate at 105 for 10 minutes: the RF value of the principal spot from the test solution corresponds to that obtained from the Standard solution.
Хе, так это монография USP?
По всей видимости это стандартная система, надо смотреть в каком то из приложений фармакопеи где описаны все ТСХ системы...
Если нужно приготовить 200 мл элюента, нужно смешать 143 мл бутанола и 57 мл солянки 1:12.
Для элюирования использовать ТОЛЬКО органический слой.
Ссылка - USP30.
ПС. Хотя я не уверен, что смешивая 143 мл бутанола и 57 мл солянки Вы получите 200 мл элюента 🙂
Swed
Eще раз спасибо. Просто заглянуть в монографию на действующее вещество не сообразил. Затмение на меня нашло вчера под конец рабочего дня 😉 .
