Любой оператор системы ЖХ-МС или ГХ-МС вам скажет, что главная причина неприятностей — это грязь. «Грязь, грязь, грязь», — повторяют они как мантру. Сводишь загрязнение к минимуму и наслаждаешься надежной работой прибора; не принимаешь необходимых мер предосторожности — наслаждайся заменой клапанов и закупкой целого перечня запчастей.
1) Не пользоваться отводным клапаном
Отводной клапан позволяет перенаправлять часть подвижной фазы на слив до подачи в масс-спектрометр. Особенно важно сбрасывать порцию ПФ, содержащую неудерживаемые компоненты. Многие из них могут оказаться нелетучими и будут загрязнять ионный источник. Если вам действительно важна чистота — используйте отводной клапан, чтобы избавиться от всего кроме целевых соединений.
2) Использовать нелетучие буферы
Методики некоторых производителей допускают использование фосфатных и других нелетучих буферов для анализа на ЖХ-МС. Теоретически это МОЖЕТ БЫТЬ допустимо, но все-таки постарайтесь избегать использования фосфатов и не изменяйте проверенным и испытанным летучим буферам, которые все мы знаем и любим. Скопившиеся нелетучие остатки не только забивают отверстие распылителя, но и меняют величину напряжения, которая на каждом электростатическом элементе ионного источника обеспечивает оптимальный (или такой как вам нужен!) режим образования ионов.
3) Работать на слишком высокой скорости потока
Хотя многие современные приборы с электрораспылением позволяют использовать для ВЭЖХ более высокие скорости потока, все же лучше оставлять ее на привычном оптимальном уровне 0,2—0,3 мл/мин. Чем выше скорость потока, тем больше подвижной фазы пройдет через прибор, а значит больше загрязнений попадет в ионный источник. Либо установите после колонки делитель потока, либо используйте колонку с меньшим внутренним диаметром (в идеале 2,1 мм), что позволит повысить линейную скорость подвижной фазы (см/сек) без увеличения объемного потока (мл/мин).
4) Анализировать образцы с высокими концентрациями
Мы все это делали — вводили в колонку образец с высокой концентрацией, чтобы уловить компоненты с низким содержанием. А это прекрасный способ быстро загадить ионный источник. Если это возможно, используйте отводной клапан, чтобы сбросить основной объем концентрированной пробы. Если вам непременно нужно, чтобы вся концентрированная проба попала в ионный источник (например, для проверки чистоты пика), постарайтесь ограничить количество вводимых проб.
5) Почаще вентилировать прибор
Масс-спектрометры надежны тогда, когда они работают непрерывно. Вентилирование прибора увеличивает износ и может привести к повреждению многих деталей. Особенно опасно частое вентилирование для такого дорогостоящего компонента, как турбонасос, который предназначен для работы в условиях высокого вакуума. При первом включении режима откачки в систему врывается поток атмосферного воздуха, создающий большие нагрузки на турбинные лопатки и особенно на подшипники. Это значительно ускоряет износ турбины.
6) Не проверять уровень масла в роторном насосе
Он большой, тяжелый и кажется надежным как танк. Об обслуживании роторного насоса легко забыть, ведь он достаточно вынослив, чтобы не требовать никакого ухода. При обычной эксплуатации эти насосы потребляют небольшое количество масла, которое теряется в виде тумана, и его нужно регулярного доливать. Кроме того, многие растворители и другие соединения, проходящие через МС, в конечном итоге растворяются в этом масле, ухудшая его характеристики и вызывая повышенный износ деталей насоса. Масло необходимо сливать и менять с рекомендуемой периодичностью. Можно заниматься маслом и почаще — некоторые роторные (форвакуумные) насосы позволяют избавляться от наиболее летучих загрязнителей. Обычно для этого используется расположенный на корпусе насоса газобалластный клапан, а проводить такое обслуживание следует еженедельно, чтобы обеспечить требуемую глубину вакуума внутри МС, а значит и высокую чувствительность вашего прибора!
7) Работать при наличии течи
Хотя большинство современных систем оповестят вас в случае любого попадания воздуха из-за нарушения герметичности, даже небольшая течь увеличит износ компонентов вакуумной системы и детектора. Если вы считаете, что в камере имеется течь, устраните ее как можно скорее.
8) Неправильно собирать прибор после чистки
Чем чаще вы будет разбирать ионный источник для чистки, тем больше вероятность не только повредить хрупкие детали, но и ошибиться при сборке. Нам всем, наверное, приходилось разбирать источник по два раза из-за неправильной установки какой-либо детали. Убедитесь в том, что при сборке вы выполняете все рекомендации производителя, многие руководства сейчас можно найти в форме видеороликов (например, на YouTube).
9) Работать при слишком низкой температуре ионного источника
Чтобы подвижная фаза испарялась, источник ионов должен быть нагрет, а температура должна соответствовать скорости потока (это зависит от прибора, поэтому обратитесь к руководству по эксплуатации). Слишком низкая температура препятствует испарению частиц аэрозоля и перенаправлению компонентов подвижной фазы на сброс. Вместо этого они распыляются на детали ионного источника ионов и увеличивают загрязнение.
10) Не проводить полное сканирования при разработке методика
Если вы получили хороший острый единичный пик искомого компонента в режиме регистрации выбранных ионов (SIM) / регистрации выбранных реакций (SRM) или регистрации множества реакций (MRM), то еще не факт, что в пробе нет других компонентов, даже если вы используете современные методы пробоподготовки, такие как твердофазная экстракция (ТФЭ). Только полное сканирование введенной пробы или использование встроенной диодной матрицы покажет, что на самом деле есть на вашей хроматограмме. Не пренебрегайте этим правилом, здесь кроется больше причин загрязнения и ошибок в количественной оценке, чем во всем остальном. Уделите больше времени разработке процедуры пробоподготовки и выбору оптимальных условий хроматографирования. В конечном счете это сбережет вам гораздо больше времени и денежных средств.
От редакторов LCGC
Эта статья подготовлена в соавторстве и под редактурой Ольги Авдеевой.
Если мы говорим о ВЭЖХ/МС, то все же не сэмплер страдает, а распылитель (nebulizer) в детекторе. Сэмплер = инжектор, устройство ввода.
Skaramush, спасибо за поправку. Внес изменения в текст.